Frotis de sangre

       Frotis sanguíneo e identificación de células sanguíneas

Fundamento
El frotis sanguíneo es una técnica clínica que permite de forma sencilla y rápida la observación de las formas celulares sanguíneas, permitiendo identificar, según el método utilizado, su número ( recuento hematológico) y la morfología de los distintos tipos celulares.

 Material a utilizar

  • Cubeta o cristalizador
  • Alcohol 90º
  • Lavador (agua)
  • Algodón
  • Lanceta
  • Porta
  • Pinza
  • Kit de tinción (nosotros utilizaremos el kit comercial Diff-Quick, que consta de 2 soluciones colorantes y un fijador (alcohol)
  • Mechero (lo usaremos para fijar la muestra una vez seca, antes de realizar la tinción)
Procedimiento
  • Lo primero que debemos hacer es preparar el materiala utilizar en el puesto de trabajo.
  • Disponemos los dos portas que utilizaremos para realizar el frotis.
  • Cargaremos el portalancetas con una lanceta nueva, desinfectaremos el pulpejo del dedo medio y procederemos a realizar la punzada.
  • Cuando salga la gotita de sangre, la dispondremos en el porta, aproximadamente a 0.5 cm del borde.
  • Disponemos el segundo porta justo sobre la gota un poco inclinado hasta que se extienda por todo el borde; en ese momento deslizaremos este porta sobre el otro con firmeza, extendiendo la muestra a todo lo largo.
  • Dejamos secar la extensión al aire.
  • Pasamos 3 o 4 veces la muestra sobre la llama del mechero para fijarla.
  • Procedemos a realizar la tinción.
        ➙Depositamos 3-4 gotas del alcohol fijador sobre esta y lo dejamos actuar 15-20 segundos. Lavamos con agua.
        ➙Depositamos 3-4 gotas del colorante anaranjado sobre la muestra y la dejamos actuar 15-20 segundos. Lavamos con agua.
        ➙Depositamos 3-4 gotas de colorante violeta sobre la muestra y dejamos actuar 15-20 segundos. Lavamos la muestra y la dejamos secar al aire.
  • Observar la muestra al microscopio, pasando secuencialmente por los objetivos 4x, 10x, 40x y finalmente (previamente hay que añadir una gota de aceite de inmersión) por el objetivo 100x.


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